تشخیص دو گونه بورلیا میکروتی و بورلیا پرسیکا عوامل تب راجعه با روش pcr-rflp و آغازگرهای اختصاصی
نویسندگان
چکیده
هدف: در این مطالعه کارآیی روش مولکولی pcr-rflp و pcr اختصاص به گونه به عنوان روش های نوین و سریع برای تعیین آلودگی نمونه های خون آلوده به بورلیا پرسیکا و بورلیا میکروتی عوامل تب راجعه بررسی شد. مواد و روش ها: dna بورلیا از خون حاوی بورلیا پرسیکا و بورلیا میکروتی با پارازیتمی بالا استخراج شد و به کمک آغازگرهای اختصاصی مناطق حفاظت شده دو ژن مختلف glpq و 16s rdna تکثیر و تعیین توالی شد؛ سپس برای افتراق بین دو گونه نقشه فیزیکی و محل برش آنزیمی روی مولکول dna هر گونه تعیین و نشانگرهای مولکولی مورد نظر شناسایی شد. سپس کارایی آنزیم های برش دهنده انتخابی در واکنش های pcr-rflp برای تفکیک و شناسایی دو گونه از همدیگر بررسی شدند. همچنین با توجه به اختلافات موجود در توالی ژن glpq آغازگرهای اختصاص به گونه برای تشخیص دو گونه طراحی و آزمایش شدند. نتایج: نتایج مطالعه نشان داد که روش pcr می تواند آلودگی را به خوبی در نمونه های خون آلوده مشخص نماید. به دنبال pcr، آنزیم های drai، hinfi، ecori، sspi، taqi برای ژن glpq و آنزیم taqi برای ژن 16s rdna قادرند دو گونه بورلیا پرسیکا و بورلیا میکروتی را از هم تفکیک نمایند. همچنین با آغازگرهای اختصاصی ژن glpq، جفت آغازگر 795r و bmglpf محصول pcr اختصاصی برای بورلیا میکروتی به طول 451 جفت باز و جفت آغازگر 128f و bpglpr محصول اختصاصی برای بورلیا پرسیکا به طول 252 جفت باز تولید می کنند که تشخیص دو گونه را امکان پذیر می سازد. نتیجه گیری: در این مطالعه روش pcr-rflp و pcr با آغازگرهای اختصاصی برای نخستین بار برای تمایز دو گونه بورلیا میکروتی و بورلیا پرسیکا استفاده شد. آغازگرهای اختصاصی (bmglpf/r) این مطالعه و pcr-rflp بسیار خوب عمل نموده و با توجه به سرعت و دقت بالای آن ها می توانند جایگزین روش کلاسیک و وقت گیر تعیین آلودگی و تشخیص این دو گونه شوند و برای استفاده در آزمایشگاه های تشخیص طبی ایران و سایر مناطق آلوده در خاورمیانه توصیه شود.
منابع مشابه
ارزیابی روشهای مولکولی pcr و xenodiagnosis برای تعیین آلودگی کنههای نرم اورنیتودوروس تولوزانی به بورلیا پرسیکا
هدف: تب راجعه کنهای بیماری حاد عفونی است که توسط اسپیروکتی به نام بورلیا پرسیکا ایجاد و توسط کنههای نرم اورنیتودوروس تولوزانی منتقل میشود. این بیماری در خاورمیانه و نیز مناطق زیادی از کشور ایران دیده میشود. یکی از مشکلات موجود درباره این بیماری تعیین آلودگی در کنهها برای تعیین ناقل بیماری است که به روش کلاسیک گزنودیاگنوزیز انجام میشود که عبارت است از خوندهی کنهها روی حیوان حساس آزمایشگا...
متن کاملتشخیص گونه های پلاسمودیوم انسانی با روش pcr-rflp
هدف: مالاریا یکی از مهمترین بیماریهای مناطق گرمسیری در جهان بشمار می آید که علاوه بر شیوع فراوان باعث مرگ و میر انسانها می گردد. تشخیص گونه های عامل این بیماری، مبتنی بر روشهای بالینی، پارازیتولوژیکی، بیوشیمیایی، سرولوژیکی و مولکولی است. هدف از مطالعه حاضر، مقایسه روش های تهیه گسترش خونی و مولکولی برای تشخیص گونه های پلاسمودیوم است. مواد و روش ها: از 46 نمونه خون مثبت مالاریایی، که با گسترش های...
متن کاملتشخیص مولکولی گونه ی Biscogniauxia mediterranea، عامل بیماری ذغالی بلوط، با استفاده از آغازگرهای اختصاصی
چکیده گونهی Biscogniauxia mediterranea، عامل بیماری ذغالی بلوط، به عنوان یکی از عوامل اصلی دخیل در زوال بلوط در ایران معرفی شده است. با این حال اطلاعاتی در مورد پراکنش، دامنهی میزبانی، روشهای انتشار و انتقال عامل بیماری در مناطق آلوده و همچنین احتمال شیوع بیماری در سایر مناطق جنگلی ایران در دسترس نمیباشد. تحقیق حاضربا هدف توسعهی یک روش مولکولی مبتنی بر واکنش زنجیرهای پلیمرازی جهت تشخیص...
متن کاملراه اندازی روش اختصاصی و حساس Real-Time PCR به منظور تشخیص گونه های بروسلا
مقدمه و هدف: بروسلوز یک بیماری مشترک بین انسان و دام ویک مشکل بهداشت عمومی در سراسر جهان می باشد.بروسلوز باعث سقط جنین ،اختلالات باروری ،عفونت های تناسلی،کاهش شیر،اورتریت و اپیدیدیمیت در میزبان اصلی می شود و از این جهت باعث عوارض مزمن و تحمیل هزینه های درمانی فراوان به بیماران و ضررهای اقتصادی زیاد به دامداران می گردد.این بیماری،در تمام نقاط ایران پراکنده است و ایران یکی ازمناطق آندمیک آل...
متن کاملشناسایی گونه سارکوسیستیس ژیگانتیه آ با روش PCR-RFLP
انگل سارکوسیست، یکی از مهمترین تک یاخته های متعلق به شاخه اپی کمپلسا (Apicomplexa) می باشد که در بین حیوانات خونگرم درکلیه نقاط جهان شایع است. در مطالعه حاضر با استفاده از تکثیر قطعه ژن S rRNA18 و برش آنزیمی، گونه سارکوسیستیس ژیگانتیه آ مورد شناسایی قرار گرفت. بدین منظور ابتدا کیست‌های ماکروسکوپی سارکوسیستیس از عضلات مری و عضلات بین دنده‌ای گوسفندان کشتار شده در کشتارگاه شهریار جمع آوری شدند. س...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستیجلد ۱۲، شماره ۲، صفحات ۵۱-۵۹
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023